前言

高尿酸血癥(hyperuricemia)是由各種原因引起的尿酸產(chǎn)生過多或腎臟排出尿酸減少，或兩者兼有，使細(xì)胞外液的尿酸鹽量呈超飽和狀態(tài)。一般認(rèn)為男性與絕經(jīng)后女性，當(dāng)血尿酸值持續(xù)＞420µmol/L(7.0mg/dl)，絕經(jīng)前女性＞350µmol/L(5.8mg/dl)被稱為高尿酸血癥。原發(fā)性高尿酸血癥常與肥胖、高血壓、高脂血癥、冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病等聚集發(fā)生，繼發(fā)性高尿酸血癥多由某些系統(tǒng)性疾病或者藥物引起。近年來，隨著人民生活水平的提高，飲食結(jié)構(gòu)和生活習(xí)慣的改變，高尿酸血癥的患病率逐年增高。重視對(duì)高尿酸血癥的治療已引起臨床的關(guān)注。因而，在研究關(guān)于治療高尿酸血癥的課題時(shí)，選擇科學(xué)合理的動(dòng)物模型就成為一個(gè)至關(guān)重要的問題。

部分造模方法

使用動(dòng)物：大鼠

【造模機(jī)制】：

增加尿酸來源或減少尿酸排泄均能升高血清尿酸濃度，從而構(gòu)建高尿酸血癥模型。常用來構(gòu)建高尿酸血癥模型的方法包括以下四個(gè)方面：

1.增加尿酸的攝入 尿酸的來源分為內(nèi)源性和外源性。內(nèi)源性尿酸約占體內(nèi)總量的80%，由氨基酸、核苷酸及其他小分子化合物合成，或由核酸分解代謝產(chǎn)生；外源性尿酸約占20%，主要從食物中直接攝入而獲得。尿酸前體物質(zhì)或富嘌呤食物可以促進(jìn)尿酸的產(chǎn)生，常用的藥物或食物主要有黃嘌呤、次黃嘌呤、酵母及沙丁魚等。在短時(shí)間內(nèi)給予大量的外源性尿酸，也可引起血尿酸明顯升高。

2.抑制尿酸的排泄 體內(nèi)的尿酸主要從腎臟清除，抑制腎臟排泄尿酸，可使血尿酸濃度增高，形成高尿酸血癥。常用的藥物包括腺嗦呤、煙酸、乙胺丁醇等。

3.抑制尿酸酶活性 尿酸酶催化尿酸氧化成過氧化氫和尿囊素等物質(zhì)，造模常用的嚙齒類動(dòng)物體內(nèi)尿酸酶的存在，是建立高尿酸血癥模型的主要障礙。因此，設(shè)法消除或抑制尿酸酶的活性成為建模的關(guān)鍵。目前可以用化學(xué)藥物或基因工程技術(shù)達(dá)到目的。氧嗪酸是尿酸酶抑制劑，屬三氮雜苯類化合物，結(jié)構(gòu)與尿酸的嘌呤環(huán)類似，可競(jìng)爭(zhēng)性地與尿酸酶結(jié)合，部分抑制尿酸酶的活性。

4.基因改造模型 利用基因工程技術(shù)使動(dòng)物產(chǎn)生尿酸酶的基因缺失，獲得尿酸酶缺乏的小鼠，造成高尿酸血癥模型。

【造模方法】：

1.補(bǔ)充尿酸或尿酸前體法 雄性Sprague­Dawley大鼠，體重(200±20)g，分籠飼養(yǎng)，讓其適應(yīng)環(huán)境1周，自由飲水進(jìn)食。飼料制備：將酵母干粉、腺嘌呤均勻拌入粉碎的大鼠顆粒飼料中，酵母干粉、腺嘌呤在飼料中的含量分別為10％和0.1%。控制酵母、腺嘌呤的進(jìn)食量分別為10g/kg體重和100mg/kg體重，自由飲水。在給予高嘌呤飼料后的第19天，大鼠可停用高嘌呤飼料，改用普通飼料喂養(yǎng)，以觀察其自然恢復(fù)情況。

2.抑制尿酸的排泄致大鼠高尿酸血癥模型 雄性Wistar大鼠，體重(200±10)g。腺嘌呤劑量為100mg/kg體重，乙胺丁醇用250mg/kg體重灌胃，1次／天，連續(xù)7~21天。加大腺嘌呤劑量可增加尿酸升高幅度，但腎損害較為明顯。

3.尿酸酶抑制劑法 雄性Sprague-Dawley大鼠，給予次黃嘌呤500mg/kg灌胃（3%可溶性淀粉配制），并皮下注射以羊毛脂和石蠟混合液（質(zhì)量比為3:2)為溶劑的氧嗪酸100mg/kg體重。

4.尿酸氧化酶敲除小鼠 尿酸氧化酶(urate oxidase,uricase)基因敲除小鼠可出現(xiàn)高尿酸血癥和腎病。

【模型特點(diǎn)】：

補(bǔ)充尿酸或尿酸前體法 高嘌呤飼料后的第7天，血尿酸略有升高，第12、19天，大鼠血清中尿酸、肌酐、尿素氮明顯升高，腎臟出現(xiàn)與臨床痛風(fēng)腎病相類似的病理改變。光鏡下可見腎小管細(xì)胞腫脹，腎小管間質(zhì)部位可見較多尿酸鹽結(jié)晶沉積，間質(zhì)有灶性淋巴單核細(xì)胞反應(yīng)，個(gè)別區(qū)域有灶性纖維化。停用高酵母、腺嘌呤飼料后，動(dòng)物血清中尿酸、肌酐、尿素氮水平繼續(xù)上升，在停用高嘌呤飼料15天時(shí)達(dá)到高峰，24天開始回落，同時(shí)觀察到的腎臟病理改變也有所減輕，兩者存在一致性。到52天時(shí)，大鼠尿酸、肌酐、尿素氮已有較大幅度下降，但與正常大鼠比較仍然較高，提示腎功能要完全恢復(fù)可能還需要一段時(shí)間。因此，在造模后2個(gè)月內(nèi)，可用該模型進(jìn)行藥物降血尿酸、改善腎功能的療效觀察。

抑制尿酸的排泄致大鼠高尿酸血癥模型 加大腺嘌呤劑量可增加尿酸升高幅度，但腎損害較為明顯，劑量增大易引起動(dòng)物死亡。也有學(xué)者使用不同組合，如黃嘌呤加乙胺丁醇等。

尿酸酶抑制劑法 造模后3、9和12小時(shí)，模型大鼠血清尿酸濃度明顯高于正常大鼠；造模后24小時(shí)，血清尿素氮和肌酐水平均明顯高于正常對(duì)照組。此方法造模高尿酸水平可維持12小時(shí)以上，同時(shí)對(duì)腎臟有明顯的損傷，但未見受試動(dòng)物死亡。

尿酸氧化酶敲除小鼠 尿酸氧化酶敲除小鼠雖然出現(xiàn)高尿酸血癥和腎病，但死亡率較高。約1/2以上的動(dòng)物在4周齡以前死亡?；蚯贸∈笥捎谒劳雎瘦^高，在一定程度上限制了使用。

【模型的評(píng)估和應(yīng)用】：

用酵母、腺嘌呤飼料喂養(yǎng)大鼠，可造成較為理想的高尿酸血癥腎病動(dòng)物模型，具有一定的創(chuàng)新性，為痛風(fēng)腎病的研究提供了更加合適的實(shí)驗(yàn)條件，有利于痛風(fēng)腎病的臨床和新藥開發(fā)研究。腹腔注射藥物法高尿酸血癥維持時(shí)間較短，不能形成穩(wěn)定持久的高尿酸血癥，可作為觀察藥物預(yù)防的模型，但不利于觀察藥物對(duì)高尿酸血癥的治療作用，并且與臨床高尿酸血癥在病因上有很大差異，也不能進(jìn)一步探討高尿酸血癥的發(fā)病機(jī)制。選擇次黃嘌呤500mg/kg和氧嗪酸100mg/kg制備大鼠高尿酸血癥模型，具有血清尿酸水平升高迅速、維持時(shí)間長(zhǎng)、器官損傷小和無動(dòng)物死亡等特點(diǎn)，是較理想的配伍劑量。提示在該劑量的基礎(chǔ)上，通過進(jìn)一步調(diào)整造模藥物的給藥次數(shù)，可以使高尿酸水平長(zhǎng)時(shí)間維持在飽和濃度以上，則有可能制備出持續(xù)性高尿酸血癥以及痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎動(dòng)物模型。有學(xué)者認(rèn)為，直接使用尿酸以及用尿酸酶抑制劑阻斷尿酸的代謝從而使血尿酸升高，與臨床上原發(fā)性高尿酸血癥的發(fā)病病因存在很大的差距。而使用乙胺丁醇、煙酸等抑制尿酸排泄，增加尿酸在體內(nèi)的蓄積等方法，也與臨床上的原發(fā)性高尿酸血癥有較大的差異。

參考文獻(xiàn)：

1.張超，曹克光，楊崇青，等. 高尿酸血癥及尿酸性腎病動(dòng)物模型的建立及應(yīng)用．實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)與管理，1999, 16(4):18-22

2.林偉青，謝建祥. 高尿酸血癥動(dòng)物模型的研究進(jìn)展. 中國(guó)藥物與臨床，2005,5(2):115-118

3.施新猷，王四旺，顧為望，等. 比較醫(yī)學(xué)．西安：陜西科學(xué)技術(shù)出版社，2003

4.徐立，時(shí)樂．次黃嘌呤與氧嗪酸鉀不同劑量配伍制備高尿酸血癥大鼠模型．中國(guó)藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志，2008, 22: 306-310

5.奚九一，趙兆琳，魯培基，等．高尿酸血癥腎病的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型研究．上海中醫(yī)藥雜志，2001,35(10):10-12

6.Akkasilpa S, Avihingsanon Y, Hanvivarlhanakul P, el al. Clinical manifestations of patients with hyperuricemia. J Med Assoc Thai, 2004, 87 (Suppl 2): S41-44

7.Wu X, Wakamiya M, Vaishnav S,et al. Hyperuricemia and urate nephropathy in urate oxidase-deficient mice.Proc Natl Acad Sci U S A, 1994,91 (2):742-746