前言
貧血(anemia)是指人體外周血紅細胞容量減少,低于正常范圍下限的一種常見的臨床癥狀。這個正常值可因不同的性別、年齡、生活地區(qū)海拔高度的不同以及生理性血漿容量的變化而有所差異。由于紅細胞容量測定較復(fù)雜,臨床上常以血紅蛋白(hemoglobin,HGB)濃度來代替。根據(jù)發(fā)病機制貧血動物模型可分為缺鐵性貧血動物模型、溶血性貧血動物模型、失血性貧血動物模型、復(fù)合性貧血動物模型和再生障礙性貧血動物模型。
溶血性貧血(hemolytic anemia,HA)是一種常見的貧血類型,是指由于某種原因使紅細胞存活期縮短,破壞增加,超過了骨髓代償能力所引起的一類貧血,是常見的造血系統(tǒng)疾病。
部分造模方法
使用動物:小鼠、大鼠、家兔
【造模機制】:
動物注射一定藍的乙酰苯肼(acetylphenylhydrazine,APH), APH是一種強氧化劑,能特異性地對紅細胞起緩慢而進行性地氧化損傷作用,尤其是干擾紅細胞內(nèi)的葡萄糖-6-磷酸脫氫酶,促進血紅蛋白變性而形成海氏小體,也可直接破壞紅細胞的膜蛋白和脂類,使膜溶解破裂,紅細胞崩解,造成溶血性貧血。
【造模方法】:
1.小鼠 第1、4、7天皮下注射APH生理鹽水溶液0.2g/kg、0.1g/kg、0.2g/kg,第9天造模成功,其他給藥方法也可以造成此模型。
2.大鼠 第1、4天皮下注射APH生理鹽水溶液0.16g/kg、0.08g/kg,第8天造模成功;或兩次劑量均為0.2g/kg,第10天造模成功。
3.家兔 以2%APH生理鹽水溶液給實驗動物皮下或肌內(nèi)注射2~3次,劑量為0.1g/kg,即可建立溶血性貧血模型。
觀察指標(biāo):一般生長狀態(tài)觀測,包括一般行為、毛發(fā)、出血點及死亡情況;外周血常規(guī)參數(shù)測定,如血紅細胞計數(shù)、白細胞計數(shù)、血小板計數(shù)和血紅蛋白含量;血細胞化學(xué)指標(biāo)變化,如中性粒細胞的堿性磷酸酶、酸性磷酸酶、三磷腺苷酸酶、琥珀酸脫氫酶、葡萄糖-6-磷酸酶和網(wǎng)織紅細胞計數(shù),海氏小體,骨髓象檢查等指標(biāo)。
【模型特點】:
注射APH后,實驗組動物陸續(xù)出現(xiàn)活動減少、毛發(fā)暗淡無光澤、攝食減少、體重下降疲乏無力、嗜睡、皮膚蒼白等現(xiàn)象。外周血血紅蛋白和紅細胞進行性下降;網(wǎng)織紅細胞、海氏小體和白細胞總數(shù)則顯著增多。中性粒細胞的堿性磷酸酶、酸性磷酸酶、三磷腺苷酸酶、琥珀酸脫氫酶、葡萄糖-6-磷酸酶,骨髓均有不同程度異常變化。
【模型的評估和應(yīng)用】:
用注射強氧化劑APH的方法可制作出符合臨床特征的溶血性貧血動物模型,APH用量可通過預(yù)實驗摸索,上述劑量可供參考。本方法建模周期短,操作簡便,模型動物癥狀和外周血象、血細胞的生化學(xué)變化與人類溶血性貧血基本相似,為研究實驗性溶血性貧血提供了一種簡易模型。
參考文獻:
1.王四旺,施新猷,黃傳貴,等.中藥藥效學(xué)研究與評價. 西安陜西科學(xué)技術(shù)出版社,2005
2.王若永,習(xí)佳飛.何麗娟,等.苯肼致小鼠溶血性貧血模型的建立.生物技術(shù)通訊,2010,21(4):544-546
3.孫紀(jì)元,王四旺,謝艷華,等.再生障礙性貧血的動物模型實驗研究中國實驗動物學(xué)雜志,2000, 10(4): 210-212
4.李秀軍.五味子酚對藥物氧化性溶血性貧血模型家兔外周血及超氧化物歧化酶活力和丙二醛含量的影響. 貴州醫(yī)藥,2005, 29 (6):500-503
5.張俊英,崔美芝,李春艷.SD大鼠缺鐵性貧血模型.中國實驗動物學(xué)雜志,2002, 12(5):278
6.施新猷,王四旺,顧為望,等.比較醫(yī)學(xué)西安:陜西科學(xué)技術(shù)出版社,2002
7.黃波,李靜,王小中,等.溶血性貧血大鼠模型的建立及實驗評價.重慶醫(yī)科大學(xué)學(xué)報,2010,35 (5):703-705
8.魏華英,馬剛,張莉,等.雌性SD大鼠缺鐵性貧血模型的建立.四川動物,2007, 26 (1): 190-191
9.Rivera S,Ganz T. Animal Models of Anerrua of Inflammation. Semin Hematol,2009,46(4):351-357
10.Wong JC,Buchwald M. Disease model:Fanconi anemia.Trends Mol Med,2002,8(3):139-142