前言

急性腎衰竭(acute renal failure,AFR)是指由于各種原因引起的腎功能急劇下降的臨床綜合征，屬臨床危重癥。腎排泄功能在短期內(nèi)迅速減退，腎小球?yàn)V過(guò)功能下降，BUN及Cr迅速升高，并引起水、電解質(zhì)及酸堿平衡失調(diào)和急性尿毒癥等現(xiàn)象。狹義的急性腎衰竭是指急性腎小管壞死。廣義的ARF按病因可分為三種：腎前性、腎后性、腎實(shí)質(zhì)性急性腎衰竭。按臨床表現(xiàn)ARF又可分為少尿型與非少尿型以及高分解型，住院患者急性腎衰竭的發(fā)病率約為5%，病死率高達(dá)50％左右。動(dòng)物模型多采用家兔和大小鼠，用化學(xué)物質(zhì)或者手術(shù)方法誘發(fā)相應(yīng)癥狀。

部分造模方法

使用動(dòng)物：大鼠

【造模機(jī)制】：

油酸(oleic acid)是一種具有較強(qiáng)毒性作用的脂肪酸，左腎動(dòng)脈注射油酸后，引起腎小管上皮細(xì)胞腫脹、壞死，間質(zhì)水腫，腎內(nèi)血管缺血，腎微循環(huán)嚴(yán)重障礙，腎臟排泄功能衰竭，形成AFR。

【造模方法】：

1.Wistar雄性大鼠，體重180~250g。油酸、溴代苯及氯化三苯基四氮唑(triphenyl tetrazolium hloride,TTC)。將大鼠隨機(jī)分成5組，生理鹽水對(duì)照組（左腎動(dòng)脈注射生理鹽水0.45ml/kg）油酸Ⅰ組、油酸Ⅱ組、油酸Ⅲ組、油酸Ⅳ組，實(shí)驗(yàn)組的大鼠左腎動(dòng)脈分別注射油酸0.05ml/kg、0.1ml/kg, 0.125ml/kg、0.15ml/kg。為了確保注射油酸時(shí)劑量的準(zhǔn)確，用植物油稀釋油酸。預(yù)試結(jié)果表明，單純植物油組(0.45ml/kg)與生理鹽水組無(wú)明顯差別。

2.左腎動(dòng)脈注射油酸后10分鐘、6小時(shí)及24小時(shí)分別取材，用TTC染色技術(shù)觀察腎TTC顯色的改變。常規(guī)制備電鏡及光鏡切片，用400T透射電鏡觀察腎小球及腎小管周?chē)?xì)血管的超微結(jié)構(gòu)。在光鏡下，每張切片觀察10個(gè)高倍視野，同時(shí)對(duì)腎小管壞死及腎小管管型以0個(gè)/HP為（－)、1~2個(gè)/HP為（＋）、3~4個(gè)／HP為(++）、>4個(gè)HP為（＋＋＋）進(jìn)行計(jì)數(shù)，對(duì)右腎、肺、心、腦、肝、小腸、睪丸也進(jìn)行光鏡觀察。

3.用阻抗法描記左腎動(dòng)脈注射油酸后10分鐘、1小時(shí)及6小時(shí)左腎容積脈波的變化。注射油酸24小時(shí)后測(cè)定BUN和Cr。

【模型特點(diǎn)】：

1.注射油酸后，腎微循環(huán)發(fā)生嚴(yán)重障礙，腎小球?yàn)V過(guò)和腎小管分泌、重吸收功能均受到損傷，引起腎臟排泄功能衰竭。左腎動(dòng)脈注射油酸0.15ml/ kg后10分鐘，腎小球毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞界限不清，核染色質(zhì)高度聚集呈團(tuán)塊狀，核膜部分消失，線粒體腫脹，基底膜局部增厚。注射后6小時(shí)，上述改變加重，可見(jiàn)內(nèi)皮細(xì)胞核碎裂，嚴(yán)重者可見(jiàn)內(nèi)皮細(xì)胞崩解。油酸注射后24小時(shí)，腎小球毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞核固縮、核碎裂、核溶解，內(nèi)皮細(xì)胞崩解，基底膜破壞。

2.腎組織結(jié)構(gòu)的改變與注射油酸的劑量相關(guān)。油酸Ⅰ~Ⅳ組可見(jiàn)腎小管壞死，油酸Ⅱ~Ⅳ組又可見(jiàn)腎小球腫脹，甚至腎小球細(xì)胞核消失，胞質(zhì)紅染，結(jié)構(gòu)破壞，其程度隨注射油酸劑量的加大而加重。左腎TTC顯色后呈蒼白色，與油酸作用時(shí)間有關(guān)，依注射油酸劑量的不同而有區(qū)別，而各組右腎顯示鮮紅色。顯色與陽(yáng)性者呈灶性不顯色蒼白區(qū)，多分布于皮質(zhì)及外髓質(zhì)，嚴(yán)重者累及整個(gè)腎切面。

3.阻抗式腎容積脈波在注射油酸后10分鐘、1小時(shí)及6小時(shí)均可見(jiàn)低平及平頂波，波高分別為注前的34%、32%、32%，比對(duì)照組降低了65%、68％及66%，表明腎內(nèi)動(dòng)脈血管彈性降低，緊張度增高，周?chē)枇υ黾樱I組織血液灌流量明顯減少。血清BUN值依注射油酸劑量的不同而有差別。油酸Ⅳ組明顯高于其他各組。各組間血清Cr無(wú)明顯差別。

【模型評(píng)估和應(yīng)用】：

本模型是以嚴(yán)重的腎微循環(huán)障礙為特點(diǎn)，合并間質(zhì)、實(shí)質(zhì)損傷，可用于模擬人類(lèi)起源于腎微循環(huán)障礙的ARF。最常用的ARF實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型有五種：腎動(dòng)脈夾閉、腎動(dòng)脈直接輸注去甲腎上腺素、甘油肌注、氯化汞及硝酸鈾靜脈注射。這些模型多用于實(shí)質(zhì)細(xì)胞方面的研究。本模型從左腎動(dòng)脈注射油酸引起腎微循環(huán)及實(shí)質(zhì)細(xì)胞的損傷，建立的大鼠ARF模型與上述五種模型比較，本模型是單側(cè)腎微循環(huán)障礙為主合并腎實(shí)質(zhì)嚴(yán)重?fù)p傷的一種新的ARF模型，可用于研究急性腎衰竭發(fā)病機(jī)制和治療方法。

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