前言
脂肪肝(fatty liver disease,FLD)是指由于各種原因引起的肝臟脂肪代謝障礙，脂類物質(zhì)的動態(tài)平衡失調(diào)，肝細胞內(nèi)脂肪堆積過多的病變。脂肪肝的發(fā)病率近年來迅速上升，已成為僅次于病毒性肝炎的第二大肝病，正嚴重威脅國人的健康。根據(jù)病因，脂肪肝可分為非酒精性和酒精性兩大類。非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease, NAFLD)發(fā)病機制目前尚未明確，治療上也缺乏有效措施，是目前研究的重點。酒精性脂肪肝動物模型以飲食誘導為主，酒精可使動物肝臟氧消耗率增高，增加血竇血的氧消耗，從而減少對小葉中心肝細胞的氧供，引起該區(qū)域的肝細胞退化與壞死，并發(fā)生脂肪變性。理想的脂肪肝動物模型應(yīng)與人類脂肪性肝病的特征相似，即病變發(fā)展過程有相對明顯的分期，從單純性脂肪肝、脂肪性肝炎、肝纖維化至肝硬化，并且應(yīng)具有模型形成率高、死亡率低、造模方法簡便易行、對實驗人員無害、造模停止后病變逆轉(zhuǎn)緩慢，便于進行藥物干預(yù)試驗等特點。目前已經(jīng)在大鼠、沙鼠、小鼠、家兔和豬等動物種屬成功地建立了脂肪肝動物模型，這些動物模型為明確脂肪肝發(fā)病機制、篩選藥物等基礎(chǔ)和臨床研究提供了很好的實驗工具。
FLD動物模型主要分為四大類：自發(fā)性模型，基因修飾動物模型，飲食、藥物或毒物誘導模型，復合模型（聯(lián)合應(yīng)用基因模型和營養(yǎng)模型）。它們在不同的層面發(fā)揮作用，但最終主要是通過使肝臟脂肪輸入（合成或攝入）增加或輸出（清除）減少的原理制成。
部分造模方法
使用動物：小鼠
【造模機制】：
針對調(diào)節(jié)肝細胞脂肪代謝的關(guān)鍵基因，通過基因修飾等方法引起肝臟脂肪代謝紊亂和氧化應(yīng)激，導致肝臟脂肪輸入和輸出平衡失調(diào)。
【模型特點】：
CD36敲除(CD36-/-)小鼠由于長鏈脂肪酸跨膜轉(zhuǎn)運失調(diào)，脂肪酸儲存和利用減少60％以上，外周血中脂肪酸及甘油三酯水平顯著上升，過多的脂肪酸轉(zhuǎn)運至肝臟，超過其β－氧化能力，引起肝臟脂質(zhì)代謝紊亂及胰島素抵抗，形成FLD。
乙酰輔酶A氧化酶(acyl-coenzyme A oxidase, AOX)敲除(AOX-/-)小鼠長鏈脂肪酸代謝及脂肪酸β氧化異常，生后1周出現(xiàn)散在性肝臟脂肪變性，2個月時肝臟脂肪變呈彌漫性改變，4~5個月時肝細胞過氧化酶體增殖物活化受體α (peroxisome proliferator-activated receptor alpha,PPARa)細胞色素P450 (cytochrome P450, CYP450)、CYP4a10和CYP4a14等基因表達增強，伴隨過氧化氫水平升高，6～7個月時肝臟脂肪酸氧化代償性增強，肝臟脂肪變可逆轉(zhuǎn)，但15個月時可并發(fā)HCA或HCC。
線粒體三功能蛋白酶(mitochondrial trifunctional protein,MTP)敲除(MTP-/-）小鼠血清轉(zhuǎn)氨酶水平隨年齡增長進行性升高，9～10個月時出現(xiàn)肝脂肪變、高胰島素血癥、胰島素抵抗及糖耐量受損，并伴有肝臟氧化應(yīng)激增強。
蛋氨酸腺苷轉(zhuǎn)移酶1A (methionine adenosyltransferase-1A, MAT1A)敲除(MAT1A-/-)小鼠肝臟谷胱甘肽等抗氧化劑含量降低，參與脂質(zhì)氧化的CYP 4a10和4a14基因表達下調(diào)。3個月時出現(xiàn)脂肪肝、肝大，8個月時出現(xiàn)自發(fā)性脂肪性肝炎和門靜脈周圍炎癥，肝細胞增殖明顯時甚至可能發(fā)生HCC。MAT1A-/-小鼠可用于探討MAT1A在肝細胞增殖、損傷以及肝腫瘤形成中的作用。
肝臟特異性核呼吸因子1(nuclear respiratory factor 1, NRF1)敲除(NRF1-/-）小鼠4周齡時出現(xiàn)脂肪性肝炎并伴有血清甘油三酯水平升高，4個月時并發(fā)細胞周圍纖維化，10個月時則可出現(xiàn)HCA或HCC。NRF1-/-小鼠肝細胞活性氧水平、脂肪含量和DNA氧化增高，適用于研究NAFLD分子機制及其與HCC的關(guān)系。
肝臟特異性PTEN敲除(PTEN-/-)小鼠在出生后10周、35~40周、44周可相繼發(fā)生脂肪性肝炎肝纖維化以及肝腺瘤。74~78周66％的小鼠會并發(fā)HCC。
磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶－固醇調(diào)節(jié)因子結(jié)合蛋白-1a (phosphoenolpyruvate carboxykinase-sterol regulatory-element binding protein 1a,PEPCK-SREBp1a)小鼠由于肝細胞特異性過度表達SREBP-1a，出生后即發(fā)生暫時性脂肪肝。斷奶后給予低碳水化合物、高蛋白質(zhì)飲食激活PEPCK，誘導多種脂肪生成酶，小鼠再次形成脂肪肝。aP2-NSREBP- 1c小鼠與PEPCK-SREBp-1a小鼠表型相似。
參考文獻：
1.施新猷．現(xiàn)代醫(yī)學實驗動物學．北京：人民軍醫(yī)出版社，2000
2.Farrell GC, van Rooyen D. Liver cholesterol: is ii playing possum in NASH? Am J Physiol Gastroinlesl Liver Physiol,2012,303 (1):G9-11
3.Maher JJ. New insights from rodent models of fatly liver disease. Anliox.id Redox Signal, 2011, 15 (2):535-550
4.Matsuzawa N,Takamura T, Kurita S, el al. Lipid-induced oxidative stress causes sleatohepalitis in, mice fed an atherogenic diet. Hepatology, 2007,46 (5):1392-1403
5.Sahai A, Malladi P, Pan X, el al. Obese and diabeti db/db mice develop marked liver fibrosis in a model of nonalcoholic steatohepalitis: role of sbortform leptin receptors and osteopontin. Am J Physiol Gastroinlest Liver Pbysiol, 2004,287 (5):Gl035-1043
6.Uno M, Kurita S, Misu H,et al. Tranilast,an anlifibrogenic agent, ameliorates a dietary rat model of nonalcoholic steatohepalitis. Hepatology, 2008, 48 (1) : 109-118
7.Xu Z,Chen L,Leung L,el al. Liver-specific i.naclivalion of the Nrfl gene in adult mouse leads lo nonalcoholic steatobepatilis and hepatic neoplasia. Proc Natl Acad Sci US A, 2005, 15; 102 (11):4120-4125
號二維碼.jpg)
