前言

脂肪肝(fatty liver disease,FLD)是指由于各種原因引起的肝臟脂肪代謝障礙，脂類物質(zhì)的動(dòng)態(tài)平衡失調(diào)，肝細(xì)胞內(nèi)脂肪堆積過多的病變。脂肪肝的發(fā)病率近年來迅速上升，已成為僅次于病毒性肝炎的第二大肝病，正嚴(yán)重威脅國人的健康。根據(jù)病因，脂肪肝可分為非酒精性和酒精性兩大類。非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease, NAFLD)發(fā)病機(jī)制目前尚未明確，治療上也缺乏有效措施，是目前研究的重點(diǎn)。酒精性脂肪肝動(dòng)物模型以飲食誘導(dǎo)為主，酒精可使動(dòng)物肝臟氧消耗率增高，增加血竇血的氧消耗，從而減少對(duì)小葉中心肝細(xì)胞的氧供，引起該區(qū)域的肝細(xì)胞退化與壞死，并發(fā)生脂肪變性。理想的脂肪肝動(dòng)物模型應(yīng)與人類脂肪性肝病的特征相似，即病變發(fā)展過程有相對(duì)明顯的分期，從單純性脂肪肝、脂肪性肝炎、肝纖維化至肝硬化，并且應(yīng)具有模型形成率高、死亡率低、造模方法簡(jiǎn)便易行、對(duì)實(shí)驗(yàn)人員無害、造模停止后病變逆轉(zhuǎn)緩慢，便于進(jìn)行藥物干預(yù)試驗(yàn)等特點(diǎn)。目前已經(jīng)在大鼠、沙鼠、小鼠、家兔和豬等動(dòng)物種屬成功地建立了脂肪肝動(dòng)物模型，這些動(dòng)物模型為明確脂肪肝發(fā)病機(jī)制、篩選藥物等基礎(chǔ)和臨床研究提供了很好的實(shí)驗(yàn)工具。

FLD動(dòng)物模型主要分為四大類：自發(fā)性模型，基因修飾動(dòng)物模型，飲食、藥物或毒物誘導(dǎo)模型，復(fù)合模型（聯(lián)合應(yīng)用基因模型和營養(yǎng)模型）。它們?cè)诓煌膶用姘l(fā)揮作用，但最終主要是通過使肝臟脂肪輸入（合成或攝入）增加或輸出（清除）減少的原理制成。

部分造模方法

使用動(dòng)物：大鼠、小鼠

【造模方法】：

膽堿蛋氨酸缺乏(methionine­choline-deficient,MCD)飲食常用來誘導(dǎo)經(jīng)典的NAFLD動(dòng)物模型。MCD飲食富含碳水化合物(40%)和脂肪(10%），但缺乏參與肝細(xì)胞脂肪酸β氧化和合成極低密度脂蛋白的蛋氨酸和膽堿，用于喂養(yǎng)的嚙齒類動(dòng)物，如大鼠和小鼠。

高脂飲食(high fat diet,HFD)模型：使用HFD（碳水化合物、脂肪、蛋白質(zhì)分別占總熱最的52%、30％和18%）飼養(yǎng)大鼠、豚鼠、家兔、犬等均可誘發(fā)NAFLD。

全胃腸外營養(yǎng)(total parenteral nutrition,TPN)模型：成年大鼠深靜脈（如上腔靜脈）插管，連接輸液泵將非蛋白營養(yǎng)液（如高葡萄糖加氨基酸的高營養(yǎng)液體或葡萄糖加脂肪乳）持續(xù)滴注。

Tsukamato-French大鼠模型：1984年，Tsukamato­French等給大鼠手術(shù)植入胃管，持續(xù)注入含乙醇的液體食料維持大鼠血中200~300mg/dl的乙醇濃度，造模3個(gè)月，或同時(shí)以熱量固定，含少量玉米油(4.9％熱量）液體食料持續(xù)胃管飼養(yǎng)30天。

乙醇灌胃模型：在喂養(yǎng)固體飼料的同時(shí)每日乙醇灌胃(11~12g/kg)大鼠4周，也可導(dǎo)致與Tsukamato-French方法相似的肝組織學(xué)病變。用高度白酒(6℃左右）每日灌胃一次(5ml/100g)，給予營養(yǎng)缺乏飼料（面粉、次粉、草粉、豆粉，按2 : 1 : 1 : 1 比例配方，另加少量豆油及食鹽），于每晚禁食至次日上午空腹灌胃后再喂飼料，連續(xù)75天即可產(chǎn)生酒精性脂肪肝。灌胃亦可使用白酒、玉米油、吡唑混合液（白酒8~12g/kg，玉米2g/kg，吡唑24mg/kg), 造模時(shí)間為12周。

【模型特點(diǎn)】：

MCD模型：簡(jiǎn)便易行，但發(fā)病及其程度與鼠的性別、品系、種類有關(guān)，飼養(yǎng)小鼠1~2周即有明顯的肝脂肪變，2周后發(fā)生肝臟壞死性炎癥繼而出現(xiàn)竇周和中央靜脈周圍纖維化，伴血清轉(zhuǎn)氨酶顯著升高和肝臟內(nèi)脂質(zhì)氧化酶基因表達(dá)上調(diào)；飲食飼養(yǎng)Sprague Dawley大鼠則進(jìn)展慢，在造模2周出現(xiàn)肝脂肪變和氧化應(yīng)激，5周時(shí)出現(xiàn)肝臟炎癥壞死伴轉(zhuǎn)氨酶輕度升高，12周出現(xiàn)肝纖維化。MCD飲食喂飼鼠肌肉和軀體脂肪含量減少伴體重下降，造模4周后外周組織對(duì)胰島素敏感可出現(xiàn)低血糖。

HFD模型：造模4周出現(xiàn)散在性肝脂肪變，8周呈現(xiàn)單純性脂肪肝，12周為脂肪性肝炎，16周肝臟炎癥壞死程度加劇伴竇周纖維化，24周脂肪變和炎癥略減輕，但纖維化加劇，甚至出現(xiàn)間隔纖維化。大鼠腹部?jī)?nèi)臟脂肪增多，外周血游離脂肪酸和總膽固醇進(jìn)行性升高，伴門靜脈內(nèi)毒素血癥、肝細(xì)胞線粒體損傷、氧應(yīng)激脂質(zhì)過氧化損傷以及肝臟庫 普弗細(xì)胞激活等現(xiàn)象，并且有胰島素抵抗，但體重和血液TG增加不明顯，

TPN模型：當(dāng)營養(yǎng)液中非蛋白能量占33％以上或總攝入量占總熱量的83％以上時(shí)，1周后大鼠肝臟即有明顯的脂肪變性。若使用高葡萄糖和氨基酸的高營養(yǎng)液體增加至所需非蛋白質(zhì)能量的146%［相當(dāng)于350非蛋白質(zhì)卡/(kg·d)］和335% 氮需要量［相當(dāng)于2.7g氨基酸氮/(kg·d) ],1/2天即出現(xiàn)肝大，2天后肝糖原、脂肪增多。至第4天肝臟脂肪增加4倍，伴隨肝內(nèi)必需脂肪酸缺乏逐漸加重。

乙醇灌胃模型：動(dòng)物體重增長(zhǎng)緩慢，飲食量明顯下降，大部分動(dòng)物會(huì)出現(xiàn)大便溏泄。病理組織學(xué)可見肝細(xì)胞水腫，呈氣球樣變，胞質(zhì)內(nèi)廣泛出現(xiàn)大小不等的圓形脂肪滴，并可見嗜酸性規(guī)則或不規(guī)則小體形成，即乙醇性玻璃小體。匯管區(qū)炎癥細(xì)胞浸潤明顯，并可見膠原纖維增生，肝竇內(nèi)皮細(xì)胞腫脹。

參考文獻(xiàn)：

1.施新猷．現(xiàn)代醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)．北京：人民軍醫(yī)出版社，2000

2.Farrell GC, van Rooyen D. Liver cholesterol: is ii playing possum in NASH? Am J Physiol Gastroinlesl Liver Physiol,2012,303 (1):G9-11

3.Maher JJ. New insights from rodent models of fatly liver disease. Anliox.id Redox Signal, 2011, 15 (2):535-550

4.Matsuzawa N,Takamura T, Kurita S, el al. Lipid-induced oxidative stress causes sleatohepalitis in, mice fed an atherogenic diet. Hepatology, 2007,46 (5):1392-1403

5.Sahai A, Malladi P, Pan X, el al. Obese and diabeti db/db mice develop marked liver fibrosis  in a  model of nonalcoholic steatohepalitis: role of sbortform leptin receptors and osteopontin. Am J Physiol Gastroinlest Liver Pbysiol, 2004,287 (5):Gl035-1043

6.Uno M, Kurita S, Misu H,et al. Tranilast,an anlifibrogenic agent, ameliorates a dietary rat model of nonalcoholic steatohepalitis. Hepatology, 2008, 48 (1) : 109-118

7.Xu Z,Chen L,Leung L,el al. Liver-specific i.naclivalion of the Nrfl gene in adult mouse leads lo nonalcoholic steatobepatilis and hepatic neoplasia. Proc Natl Acad Sci US A, 2005, 15; 102 (11):4120-4125