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ELISA/氧化物/酶活性檢測平臺樣本采集要求
發(fā)布時間:2024-03-07
作者:里來醫(yī)學(xué)

 

注:以下所有樣本盡量新鮮!

 

1、血清樣本收集

 無抗凝劑的紅頭管/普通EP管采集全血標(biāo)本,全血樣品于室溫放置1小時或2-8℃過夜后于,3000-3500rpm,離心10-15分鐘,取上清于EP管中,收集血液的試管應(yīng)為一次性的無熱原,無內(nèi)毒素試管。

② 于-80℃保存運輸,中途應(yīng)避免反復(fù)凍融。請勿晃動采血管,紅細(xì)胞易破碎,出現(xiàn)溶血,從而影響實驗結(jié)果。

2、血漿樣本收集

① 抗凝劑推薦使用EDTA鈉鹽(紫色采血管)采集全血標(biāo)本,緩慢顛倒十次使血漿與抗凝劑充分混合,4℃靜置暫存靜置10-20分鐘,3000-3500rpm,離心10-15分鐘,取上清于EP管中,避免使用溶血,高血脂樣品。

② 于-80℃保存運輸,中途應(yīng)避免反復(fù)凍融。請勿晃動采血管,紅細(xì)胞易破碎,出現(xiàn)溶血,從而影響實驗結(jié)果。

注:全血樣本未離心分離前禁止冰凍。

3、組織樣本收集

取新鮮組織樣本于凍存管中,迅速于液氮速凍后,轉(zhuǎn)移到-80℃保存或運輸。

如自行進(jìn)行組織勻漿處理可按下述方法進(jìn)行:

① 用預(yù)冷的生理鹽水沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會影響測量結(jié)果)與其他物質(zhì),稱重后剪碎。

② 將剪碎的組織與對應(yīng)體積的勻漿介質(zhì)(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應(yīng)9ml的PBS,制備成10%的勻漿液,具體體積可根據(jù)實驗需要適當(dāng)調(diào)整),加入玻璃勻漿器中,于冰水浴條件下充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或反復(fù)凍融。

③ 最后將勻漿液于3000-3500rpm,離心10分鐘,取上清于EP管中,于-80℃保存運輸。

注:本方法為常規(guī)elisa試劑盒樣本處理方式,具體操作需按試劑盒說明書進(jìn)行。

4、細(xì)胞收集

① 貼壁細(xì)胞用冷的PBS輕輕清洗,然后用胰蛋白酶消化,3000-3500rpm離心5分鐘后收集細(xì)胞;懸浮細(xì)胞可直接離心收集于EP管中,-80℃保存運輸。

5、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其他動物體液

① 收集液體后于2-8℃,3000-3500rpm離心20分鐘,除去雜質(zhì)及細(xì)胞碎片。取上清于EP管中,于-80℃保存運輸。

 

注意

(1)其他樣本如尿液、胸腹水、腦脊液等也可檢測,建議采樣前與里來生物聯(lián)系,樣品的取材直接影響到您的實驗結(jié)果;

(2)收集標(biāo)本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定;

(3)因特殊原因需周期收集的標(biāo)本,需將標(biāo)本及時分裝后置于-80℃下長期或-20℃短期保存,避免反復(fù)凍融;

(4)-20℃可保存1個月,-80℃可保存6個月;

(5)標(biāo)本使用前應(yīng)緩慢均衡至室溫,不應(yīng)加熱使之溶解;

(6)標(biāo)本溶血會影響最后檢測結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項檢測。

ELISA/氧化物/酶活性檢測平臺樣本采集要求
發(fā)布時間:2024-03-07
作者:里來醫(yī)學(xué)

 

注:以下所有樣本盡量新鮮!

 

1、血清樣本收集

 無抗凝劑的紅頭管/普通EP管采集全血標(biāo)本,全血樣品于室溫放置1小時或2-8℃過夜后于,3000-3500rpm,離心10-15分鐘,取上清于EP管中,收集血液的試管應(yīng)為一次性的無熱原,無內(nèi)毒素試管。

② 于-80℃保存運輸,中途應(yīng)避免反復(fù)凍融。請勿晃動采血管,紅細(xì)胞易破碎,出現(xiàn)溶血,從而影響實驗結(jié)果。

2、血漿樣本收集

① 抗凝劑推薦使用EDTA鈉鹽(紫色采血管)采集全血標(biāo)本,緩慢顛倒十次使血漿與抗凝劑充分混合,4℃靜置暫存靜置10-20分鐘,3000-3500rpm,離心10-15分鐘,取上清于EP管中,避免使用溶血,高血脂樣品。

② 于-80℃保存運輸,中途應(yīng)避免反復(fù)凍融。請勿晃動采血管,紅細(xì)胞易破碎,出現(xiàn)溶血,從而影響實驗結(jié)果。

注:全血樣本未離心分離前禁止冰凍。

3、組織樣本收集

取新鮮組織樣本于凍存管中,迅速于液氮速凍后,轉(zhuǎn)移到-80℃保存或運輸。

如自行進(jìn)行組織勻漿處理可按下述方法進(jìn)行:

① 用預(yù)冷的生理鹽水沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會影響測量結(jié)果)與其他物質(zhì),稱重后剪碎。

② 將剪碎的組織與對應(yīng)體積的勻漿介質(zhì)(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應(yīng)9ml的PBS,制備成10%的勻漿液,具體體積可根據(jù)實驗需要適當(dāng)調(diào)整),加入玻璃勻漿器中,于冰水浴條件下充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或反復(fù)凍融。

③ 最后將勻漿液于3000-3500rpm,離心10分鐘,取上清于EP管中,于-80℃保存運輸。

注:本方法為常規(guī)elisa試劑盒樣本處理方式,具體操作需按試劑盒說明書進(jìn)行。

4細(xì)胞收集

① 貼壁細(xì)胞用冷的PBS輕輕清洗,然后用胰蛋白酶消化,3000-3500rpm離心5分鐘后收集細(xì)胞;懸浮細(xì)胞可直接離心收集于EP管中,-80℃保存運輸。

5、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其他動物體液

① 收集液體后于2-8℃,3000-3500rpm離心20分鐘,除去雜質(zhì)及細(xì)胞碎片。取上清于EP管中,于-80℃保存運輸。

 

注意

(1)其他樣本如尿液、胸腹水、腦脊液等也可檢測,建議采樣前與里來生物聯(lián)系,樣品的取材直接影響到您的實驗結(jié)果;

(2)收集標(biāo)本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定;

(3)因特殊原因需周期收集的標(biāo)本,需將標(biāo)本及時分裝后置于-80℃下長期或-20℃短期保存,避免反復(fù)凍融;

(4)-20℃可保存1個月,-80℃可保存6個月;

(5)標(biāo)本使用前應(yīng)緩慢均衡至室溫,不應(yīng)加熱使之溶解;

(6)標(biāo)本溶血會影響最后檢測結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項檢測。